Anti-ABCG1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P45844

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ABCG1

• ABCG1, auch bezeichnet als ATP-bindende Kassetten-Transporter 8 oder weißes Protein-Homolog, gehört zur G-Unterfamilie der ATP-bindende Kassetten (ABC)-Transporter und fungiert als Halbtransporter, der wahrscheinlich ein Homodimer bildet.
• Es katalysiert den ATP-abhängigen Efflux von Phospholipiden wie Sphingomyelin, Cholesterin und oxygenierten Cholesterinderivaten wie 7beta-Hydroxycholesterin (PubMed:17408620, PubMed:24576892). Dieser Lipidtransportprozess ist albumininabhängig (PubMed:16702602). Verwandte Referenzen: PMID:17408620, PMID:24576892, PMID:16702602
• Durch den Export von zytotoxischem 7beta-Hydroxycholesterin verhindert ABCG1 den Zelltod, was seine Rolle bei der Aufrechterhaltung der zellulären Lipidhomöostase und dem Schutz von Makrophagen vor Oxysterol-induzierter Apoptose unterstreicht (PubMed:17408620). Verwandte Referenzen: PMID:17408620
• ABCG1 lokalisiert an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, der Golgi-Apparat-Membran und der Zellmembran, was sowohl den intrazellulären Lipidverkehr als auch den Lipidefflux an der Plasmamembran ermöglicht.
• Es wird in mehreren Geweben exprimiert, mit ausgeprägter Expression in Makrophagen; bemerkenswert ist, dass die ABCG1-Expression in Makrophagen von Patienten mit Morbus Tangier hochreguliert ist, was es mit Cholesterinstoffwechselstörungen verbindet.
• Posttranslationale Palmitoylierung von ABCG1, wie in UniProt annotiert, moduliert wahrscheinlich seine Membranassoziation und funktionelle Aktivität.
• Das ABCG1-Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Proteinisoformen entstehen, die unterschiedliche regulatorische oder Transporteigenschaften aufweisen können.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid, das von den Aminosäuren 100–200 des humanen ABCG1 (NP_004906.3) abgeleitet ist, einer Region, die wahrscheinlich in denaturierten Proben exponiert ist, sodass der Antikörper potenziell für WB unter reduzierenden Bedingungen geeignet ist.
• Bei dem vorhergesagten Proteingewicht von 76 kDa verwenden Sie einen geeigneten Molekulargewichtsmarkerbereich und optimieren Sie den Gelprozentsatz (z. B. 8–10 % SDS-PAGE) für eine optimale Auflösung von ABCG1-Banden.
• Kreuzreaktivität mit murinem und Ratten-ABCG1 deutet auf Epitopkonservierung hin; validieren Sie die Spezifität mit Lysaten relevanter Zelltypen, wie Makrophagenlinien oder primären Makrophagen.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem ABCG1-Protein oder dem immunisierenden Peptid als Beschichtungsantigen und fügen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen hinzu.
• Um die Antikörperspezifität zu bestätigen, verwenden Sie ABCG1-überexprimierende Zelllysate oder Knockout-/Knockdown-Modelle und testen Sie eine Reihe von Antikörperverdünnungen.

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