Anti-ABCA2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9BZC7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ABCA2-Funktion und -Lokalisierung

• ABCA2 (ATP-binding cassette sub-family A member 2), auch bekannt als ATP-binding cassette transporter 2 oder ABC2, ist ein Mitglied der ABC-Transporter-Superfamilie, die an der ATP-abhängigen Translokation von Substraten über Membranen beteiligt ist.
• Es fungiert als wahrscheinlicher Lipidtransporter, der die Cholesterinsequestrierung im späten Endosom/Lysosom durch Regulation des intrazellulären Sphingolipid-Stoffwechsels moduliert und an der Cholesterin-Homöostase teilnimmt. Verwandte Referenzen: PMID:15238223, PMID:21810484, PMID:24201375
• ABCA2 kann die transbilayer Verteilung von Ceramid in intralumalalen Membranbilayern verändern, dessen Retention im äußeren Blatt begünstigen und zu einer erhöhten sauren Ceramidase-Aktivität führen, was die Deacylierung von Ceramid zu Sphingosin und die Sequestrierung von freiem lysosomalem Cholesterin erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:24201375
• Das Protein ist auch an der Regulation der Amyloid-beta (Aβ)-Produktion beteiligt, entweder durch Modulation des Sphingolipid-Stoffwechsels, um die Transkription des Amyloid-Precursor-Proteins (APP) zu beeinflussen, oder durch seine Rolle bei der γ-Sekretase-Verarbeitung von APP. Verwandte Referenzen: PMID:22086926, PMID:26510981
• ABCA2 spielt möglicherweise eine Rolle bei der Myelinbildung (nach Homologie).
• Subzellulär lokalisiert sich ABCA2 primär zu den Membranen von Endosomen und Lysosomen.
• Die Gewebeexpressionsanalyse zeigt hohe Spiegel in Gehirn, peripheren Blutzellen und Eierstöcken, mit einer geringeren Expression in Niere und Leber.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Methylierung; das Protein verfügt über zwei ATP-Bindedomänen und mehrere transmembrane Helices, was seiner Transporterfunktion entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 140–350) liegt im N-terminalen Bereich des humanen ABCA2; Benutzer sollten die Sequenzidentität mit der Zielspezies überprüfen, wenn eine Kreuzreaktivität über Mensch, Maus und Ratte hinaus erwartet wird.
• Für Western Blots sollte aufgrund der großen Proteingröße (~270 kDa) ein Polyacrylamidgel mit hohem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und verlängerte Transferzeiten verwendet werden, um ein effizientes Blotting zu gewährleisten.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für den Nachweis von endosomalen/lysosomalen Membranproteinen optimiert werden; erwägen Sie die Verwendung von Methanol oder einer Detergens-basierten Permeabilisierung.
• Die ELISA-Leistung kann unter Verwendung von rekombinanten ABCA2-Fragmenten oder Zelllysaten bewertet werden; ein indirekter ELISA kann zur Titerbestimmung geeignet sein.
• Bei der Analyse von Maus- oder Rattengeweben bestätigen Sie die Kreuzreaktivität durch Sequenzalignment der Immunogenregion und erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen.

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