Anti-ABCA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper - O95477

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ABCA1-Funktion und -Lokalisierung

• Encodiert Phospholipid-transportierende ATPase ABCA1, ein Mitglied der ATP-Binding-Cassette-(ABC)-Transporterfamilie, beteiligt an der Translokation von Phosphatidylcholin und Phosphatidylserin vom zytoplasmatischen zum extrazellulären Blatt der Membran, gekoppelt an ATP-Hydrolyse. Verwandte Referenzen: PMID:24097981 PMID:35974019

• Spielt eine Schlüsselrolle beim Cholesterin-Efflux von Zellen zu Apolipoproteinen, erleichtert die Bildung von neuartigen High-Density-Lipoproteinen (HDLs) und den reversen Cholesterintransport. Verwandte Referenzen: PMID:10533863 PMID:14754908 PMID:24097981

• Lokalisiert sich in der Zellmembran und Endosomen, konsistent mit ihrer Rolle beim Lipidtransport zwischen intrazellulären Kompartimenten und der Plasmamembran.

• Weit verbreitet exprimiert, mit höchsten Spiegeln in Makrophagen, was ihre kritische Funktion im Makrophagen-Cholesterin-Homöostase und der Prävention von Arteriosklerose widerspiegelt.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Palmitoylierung, die ihre Aktivität und Membranassoziation regulieren können.

• Klinisch signifikant, wobei Krankheitsvarianten in ABCA1 mit der Tangier-Krankheit und familiärem HDL-Mangel in Verbindung gebracht werden, charakterisiert durch stark reduziertes HDL-Cholesterin und erhöhtes kardiovaskuläres Risiko.

• Das Protein enthält zwei ATP-Bindungsdomänen, Disulfidbrücken und Glykosylierungsstellen und wird vorhergesagt, die Membran mehrfach zu durchspannen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen dem C-terminalen Bereich (aa 1870–2120) von humanem ABCA1 entspricht, erkennt der Antikörper möglicherweise Epitope in diesem distalen Domäne, die vorhergesagt extrazellulär ist; daher kann er für die Detektion von oberflächenlokalisiertem ABCA1 in IF/ICC unter nicht-permeabilisierenden Bedingungen geeignet sein. Validieren Sie dies jedoch im entsprechenden Probensystem.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts von ABCA1 (~254 kDa) sollten verlängerte Transferzeiten oder Gele mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 % SDS-PAGE) in Betracht gezogen und die Transfereffizienz mit einem Protein-Leiter oder einer Totalprotein-Färbung überprüft werden.
• Für WB ist eine Ladungskontrolle mit ähnlichem hohem Molekulargewicht möglicherweise erforderlich; alternativ kann Ponceau S-Färbung den Transfer bestätigen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet; jedoch sollte der Grad der Reaktivität in diesen Spezies empirisch unter Verwendung von Gewebe- oder Zelllysaten, die ABCA1 exprimieren, bestimmt werden.

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