Anti-A2ML1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - A8K2U0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Alpha-2-Makroglobulin-ähnliches Protein 1 Funktion und Lokalisierung

• A2ML1 (Alpha-2-Makroglobulin-ähnliches Protein 1) ist ein sekretierter Proteaseinhibitor aus der Alpha-2-Makroglobulin-Familie. Es ist auch als OMS, p170 oder CPAMD9 bekannt.
• Es hemmt alle vier Klassen von Proteinasen über einen einzigartigen Fängermechanismus. Eine Köderregion mit spezifischen Spaltstellen löst bei Spaltung eine Konformationsänderung aus, die die Protease einfängt. Die eingefangene Enzym bleibt gegen kleine Substrate aktiv, aber nicht gegen große.
• Nach der Spaltung wird eine Thioesterbindung hydrolysiert, die die kovalente Bindung von A2ML1 an die Protease vermittelt. Dieser Mechanismus beinhaltet wichtige Disulfidbindungen und trägt zu seiner inhibitorischen Spezifität bei.
• A2ML1 zeigt inhibitorische Aktivität gegen Chymotrypsin, Papain, Thermolysin und Subtilisin A, und in geringerem Maße gegen Elastase, aber nicht gegen Trypsin.
• Das Protein könnte eine wichtige Rolle bei der epidermalen Desquamation durch Hemmung extrazellulärer Proteasen spielen. Es wird hauptsächlich in der Körnerzellschicht am apikalen Rand von Keratinozyten exprimiert, mit zusätzlicher Expression in Plazenta, Hoden und Thymus.
• Kodiert durch das A2ML1-Gen auf Chromosom 12 (Locus 12p13.31), unterliegt das Protein alternativem Spleißen und wird als 161 kDa Glykoprotein detektiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western-Blot-Analyse sollten Sie die Verwendung von reduzierender SDS-PAGE in Betracht ziehen, um ein Band bei etwa 161 kDa zu detektieren. Validieren Sie den Antikörper in Ihrem relevanten Zell- oder Gewebelysatsystem.
• Das Immunogen (Aminosäuren 400-500) ist wahrscheinlich zwischen Mensch und Ratte konserviert, was die berichtete Kreuzreaktivität unterstützt. Führen Sie eine Sequenzalignment durch, um die Epitopkonservierung zu überprüfen, wenn Sie diesen Antikörper in anderen Spezies verwenden.
• Für ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper, um optimale Beschichtungs- und Detektionskonzentrationen gegen natives oder rekombinantes A2ML1 zu bestimmen. Schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um den Hintergrund zu minimieren.
• Angesichts der Rolle des Proteins bei der Proteasehemmung sollten Sie mögliche Wechselwirkungen mit endogenen Proteasen in Probenpräparationen, die die Detektion beeinflussen könnten, mit Vorsicht betrachten.

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