Anti-14-3-3 sigma Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P31947

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: 14-3-3 sigma Funktion und Lokalisierung

• 14-3-3 sigma (auch bekannt als Stratifin oder Epithelialzellmarkerprotein 1) ist ein Adapterprotein, das vom SFN-Gen kodiert wird und vorwiegend in Geweben exprimiert wird, die reich an verhornendem Plattenepithel sind.
• Es funktioniert durch die Bindung an Phosphoserin/Phosphothreonin-Motive auf einer breiten Palette von Signalpartnern, moduliert im Allgemeinen deren Aktivität und ist an Wegen wie Zellzyklus, Apoptose und Wachtrumssignalgebung beteiligt (PubMed:15731107, PubMed:22634725, PubMed:28202711). Verwandte Referenzen: PMID:15731107, PMID:22634725, PMID:28202711
• Es wirkt als ein TP53/p53-regulierter Inhibitor des G2/M-Zellzyklusfortschritts und trägt zum DNA-Schadenskontrollpunkt bei (PubMed:9659898). Verwandte Referenzen: PMID:9659898
• 14-3-3 sigma fördert die zytoplasmatische Retention des GBP1-GTPases durch Bindung an phosphoryliertes GBP1 und hemmt so die angeborene Immunantwort (PubMed:37797010). Verwandte Referenzen: PMID:37797010
• In Epithelzellen erhält es die Zellzellverbindungadhäsion von Desmosomen durch Interaktion mit und Sequestrierung von PKP3 im Zytoplasma, was den Austausch an Desmosomenplaque erleichtert und die interzelluläre Adhäsion bewahrt (PubMed:24124604, PubMed:29678907). Verwandte Referenzen: PMID:24124604, PMID:29678907
• Das Protein kann die Auto-Ubiquitinierung und den Abbau von MDM2 regulieren und dadurch p53/TP53 aktivieren (PubMed:18382127). Verwandte Referenzen: PMID:18382127
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zytoplasma, den Zellkern und die Sekretion, was seinen vielfältigen Rollen in der Signaltransduktion und der interzellulären Kommunikation entspricht.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Funktionen und Interaktionen feinabstimmen.
• Die Gewebeexpression ist weitgehend auf Plattenepithelien beschränkt, was es zu einem nützlichen Marker für Epitheldifferenzierung und Pathologiestudien macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das dem N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1-100) von humanem 14-3-3 sigma entspricht. Dieser Bereich kann kritische Phosphoepitope enthalten; stellen Sie sicher, dass Ihre Probenvorbereitung den Phosphorylierungszustand bewahrt, falls relevant.
• Für den Western Blot (WB) ist ein Band um 28 kDa zu erwarten (berechnetes Molekulargewicht beträgt ~27,8 kDa). Validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen, wie Lysaten aus geschichtetem Epithelgewebe oder Zelllinien (z. B. HaCaT, A431), wo eine endogene Expression erwartet wird.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Antigen-Retrieval-Methoden in Betracht ziehen (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und die Spezifität unter Verwendung von Haut, Speiseröhre oder anderem Plattenepithel als positives Kontrollgewebe überprüfen.
• Im ELISA ermöglicht das peptidbasierte Immunogen die direkte Beschichtung des Peptids für Standard-Assay-Einrichtungen; titrieren Sie die Antikörperkonzentration, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem 14-3-3 sigma wurde berichtet; jedoch wird vor der Anwendung auf andere Modellorganismen eine Sequenzalignment über Arten hinweg empfohlen.

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