Alpha-Fetoprotein (AFP) Maus-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P02771

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Alpha-Fetoprotein

• Alpha-Fetoprotein (AFP), auch bekannt als Alpha-1-Fetoprotein und Alpha-Fetoglobulin, ist ein sezerniertes Glykoprotein, das zur Albuminfamilie gehört.
• AFP bindet Kupfer, Nickel und Fettsäuren und zeigt zudem eine mäßige Bilirubin-Bindungsfähigkeit, allerdings weniger effizient als Serumalbumin.
• Nur ein geringer Anteil (weniger als 2 %) des menschlichen AFP weist Östrogen-Bindungseigenschaften auf, was auf eine begrenzte Wechselwirkung mit Hormonliganden hindeutet.
• Es wird überwiegend von der fetalen Leber und dem Dottersack synthetisiert und ist am häufigsten im fötalen Plasma vorhanden; die Spiegel fallen nach der Geburt stark ab und sind bei gesunden Erwachsenen niedrig.
• Das Protein ist reich an posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und Sulfatierung, und enthält mehrere Disulfidbindungen.
• Strukturell verfügt es über repetitive Domänen und wird als sezerniertes, metallbindendes Phosphoprotein klassifiziert.
• Als etablierter klinischer Biomarker sind erhöhte AFP-Spiegel im Serum mit hepatozellulärem Karzinom, Keimzelltumoren und fötalen Entwicklungsstörungen verbunden, was es zu einem wichtigen Ziel für die Entwicklung diagnostischer Antikörper macht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen deckt fast das gesamte reife Protein (Aminosäuren 19–609) ab und kann Epitope über mehrere Domänen bereitstellen; wenn eine domänenspezifische Detektion erforderlich ist, sollte eine Epitopkartierung in Betracht gezogen werden.
• Für den Western Blot beträgt die angegebene Proteinmasse 69 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann die beobachtete Bande jedoch verschoben sein, und reduzierende/nicht reduzierende Bedingungen können für eine optimale Auflösung getestet werden.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC wird AFP sezerniert und kann ein vesikuläres oder extrazelluläres Färbemuster aufweisen; eine geeignete Fixierung und Permeabilisierung (falls erforderlich) sollte für den jeweiligen Zelltyp validiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen wird ein Paartest mit Nachweisantikörpern empfohlen, die nicht überlappende Epitope erkennen, um Konkurrenz zu vermeiden; das rekombinante Immunogen kann als Positivkontrolle dienen.
• Es wurde eine Kreuzreaktivität mit murinem AFP nachgewiesen; bei der Verwendung von Mausmodellen kann endogenes AFP nachgewiesen werden; schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um exogene von endogenen Signalen zu unterscheiden.
• Serum-/Plasmaproben sind üblich für den AFP-Nachweis; aufgrund hoher AFP-Konzentrationen unter bestimmten Bedingungen sollte die Optimierung der Probenverdünnung in Betracht gezogen werden.

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