Acetyl-Histon H4 (Lys5) Kaninchen monoklonaler Antikörper (P62805) für WB, ChIP, CUT&Tag

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H4-Funktion und Lokalisierung

Histon H4 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, essentiell für die DNA-Kompaktierung zu Chromatin und die Regulation von Transkription, Replikation, DNA-Reparatur und chromosomaler Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen, bekannt als "Histon-Code", gesteuert.

Die Acetylierung von Histon H4 an Lysin 5 (K5; entspricht Lys-6 in UniProt P62805) ist eine zentrale Modifikation, die mit aktiven Chromatinzuständen assoziiert ist. Diese Markierung wird durch Histon-Acetyltransferasen (HATs) eingeführt und durch Deacetylasen (HDACs) entfernt, wodurch die Genexpression dynamisch beeinflusst wird. Acetyliertes H4K5 ist an Promotorregionen aktiv transkribierter Gene angereichert und trägt zur Chromatin-De-Kompaktierung und transkriptionellen Aktivierung bei. Verwandte Referenzen: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

Histon H4 wird durch mehrere Genkopien (H4C1–H4C16) kodiert, die sich in Histon-Clustern auf den Chromosomen 1 und 6 befinden. Das Protein ist über Spezies hinweg hochkonserviert, was die vorhergesagte breite Kreuzreaktivität dieses Antikörpers erklärt. H4 unterliegt umfangreichen kombinatorischen Modifikationen; K5 kann auch anderen Acylierungen wie Crotonylierung, Butyrylierung und 2-Hydroxyisobutyrylierung unterliegen, was die Komplexität des Histon-Codes unterstreicht.

Subzellulär ist Histon H4 primär nukleär und assoziiert mit Chromosomen. Während der Spermatogenese lokalisiert acetyliertes H4 im Kern von Spermatiden der Stufe 11. Die Modifikationen des N-terminalen Endes, einschließlich der K5-Acetylierung, spielen eine zentrale Rolle beim Chromatin-Remodeling und der Rekrutierung von Effektorproteinen. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser kaninchen-monoklonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches acetyliertes Peptid gerichtet, das Lysin 5 von humanem Histon H4 umspannt. Es wird erwartet, dass er spezifisch an K5 acetyliertes H4 (Lys-6 in UniProt P62805) erkennt und möglicherweise minimale Kreuzreaktivität mit unmodifiziertem H4 oder anderen acetylierten Lysinen aufweist.
• Für Western Blot (WB) sollten Histon-angereicherte oder säureextrahierten Proteinpräparationen verwendet werden, um das Signal zu verstärken. Das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H4 beträgt 11 kDa.
• Bei Immunpräzipitation (IP) und Chromatin-basierten Anwendungen (ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag) sollte der Antikörper titriert und die Vernetzungs-/Fixierungsbedingungen optimiert werden. Die vorhergesagte breite Spezies-Kreuzreaktivität (human, Maus, Ratte und andere) deutet auf eine breite Anwendbarkeit in Säugetiermodellen hin, eine Validierung im spezifischen Proben-System wird jedoch empfohlen.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und ELISA sollten geeignete Kontrollen (z.B. nicht-acetyliertes Kompetitionspeptid) verwendet werden, um die Signalspezifität zu bestätigen.

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