Acetyl-Histon H4 K91 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (P62805) – WB, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H4-Funktion und Lokalisierung

Histon H4 ist eines der Kernhistone, die das Nukleosom bilden, die grundlegende Einheit des Chromatins. Zusammen mit H2A, H2B und H3 wickelt es DNA um das Histonoktamer, verdichtet das Genom und reguliert den Zugang für Transkription, Replikation und Reparatur. Histon H4 spielt eine zentrale Rolle in der dynamischen Regulation der Chromatinstruktur durch eine Vielzahl posttranslationaler Modifikationen (PTMs), die zusammen als "Histon-Code" bekannt sind. Zu diesen Modifikationen gehören Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Ubiquitylierung und viele andere, die hauptsächlich am N-terminalen Schwanz, aber auch in der globulären Domäne auftreten.

Die Acetylierung spezifischer Lysinreste auf Histon H4 ist mit transkriptioneller Aktivierung und offener Chromatinstruktur assoziiert. Lysin 91 (K91), das sich in der globulären Domäne von H4 befindet, ist ein solcher Rest, der acetyliert werden kann. Es wurde gezeigt, dass die Acetylierung an K91 (entsprechend K92 in der UniProt-Isoform P62805) die Chromatin-Dynamik reguliert und DNA-Reparaturprozesse beeinflussen kann. Verwandte Referenzen: PMID:19818714

Die hochkonservierte Natur von Histon H4 in Eukaryoten stellt sicher, dass Acetylierungs-spezifische Antikörper wie dieser Anti-Acetyl-H4-K91 eine breite Kreuzreaktivität aufweisen, was sie zu wertvollen Werkzeugen für epigenetische Studien in mehreren Spezies macht. H4 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert, mit Chromosomen assoziiert, und ist während des gesamten Zellzyklus vorhanden, wobei sich spezifische Acetylierungsmuster während Differenzierung und Entwicklung ändern. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) verwenden Sie Histon-angereicherte Kernextrakte oder säureextrahiertes Histon, um die Detektion zu verbessern. Ziehen Sie eine negative Kontrolle wie ein nicht-acetyliertes Peptid oder eine Behandlung mit einem Deacetylase-Inhibitor (z.B. TSA) in Betracht, um die Spezifität für die acetylierte K91-Form zu bestätigen. Das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H4 beträgt etwa 11 kDa, aber die Wanderung kann je nach PTMs leicht variieren.
• Bei Immunfluoreszenz / Immunzytochemie (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen (z.B. 4% PFA- oder Methanol-Fixierung, gefolgt von 0,1% Triton X-100), um das Epitop zu erhalten. Eine Gegenfärbung mit DNA-Farbstoffen (z.B. DAPI) kann die nukleäre Lokalisierung bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen verwenden Sie synthetisches acetyliertes K91-Peptid gegenüber unmodifiziertem Peptid als Beschichtungsantigene, um die Antikörperspezifität und den Titer zu bewerten. Dieser Antikörper wird aufgrund der hohen Sequenzhomologie von Histon H4 vorhergesagt, mit Maus, Ratte und anderen Spezies zu kreuzreagieren, überprüfen Sie dies jedoch in Ihrem experimentellen System.

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