Acetyl-Histon H4-K5 Kaninchen-polyklonaler Antikörper (P62805) – Anwendungen für WB, ELISA, ChIP

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H4

• Histon H4 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, das DNA verpackt und zu Chromatin kompaktiert. Dies schränkt die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinen ein, die DNA als Template benötigen, wodurch Histone im Zentrum der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität stehen. Verwandte Referenzen: Keine direkt zitiert; allgemeine funktionale Annotation.

• Die Zugänglichkeit der DNA wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen (PTMs) reguliert, der als „Histon-Code“ bekannt ist, zusammen mit Nukleosomen-Remodellierung. Eine kritische PTM ist die Acetylierung von Lysin 5 (K5), die N6-Acetyllysin an Position 6 der kanonischen UniProt-Sequenz entspricht. Verwandte Referenzen: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

• Die subzelluläre Lokalisation ist überwiegend nukleär, mit Assoziation zu Chromosomen. Während der Spermatogenese wurde beobachtet, dass acetyliertes Histon H4 spezifisch im Kern von Spermatiden im Schritt 11 lokalisiert ist. Verwandte Referenzen: (Durch Ähnlichkeit) UniProtKB P62805.

• Histon H4 erfährt zahlreiche weitere Modifikationen, darunter Methylierung, Citrullinierung, Crotonylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die gemeinsam Genexpressionsmuster und Chromatindynamik orchestrieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid, das die K5-Region des menschlichen Histons H4 umfasst. Dieses Design zielt darauf ab, eine hohe Spezifität für die acetylierte Form des Proteins zu erreichen.
• Für Western Blot (WB) empfehlen sich nukleär angereicherte Extrakte oder säureextrahierte Histone zur Verbesserung der Detektion. Eine Bande um 11 kDa ist zu erwarten.
• Im ELISA kann der Antikörper zur Bindung oder Detektion von acetylierten Histonpeptiden oder rekombinanten Histon H4-Proteinen verwendet werden. Zur Erzielung eines optimalen Signal-Rausch-Verhältnisses wird eine Titrierung empfohlen.
• Für die Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) kann dieser Antikörper zur Anreicherung genomischer Regionen verwendet werden, die durch H4K5ac markiert sind. Eine Validierung im relevanten Zelltyp und geeignete Kontrollen (z. B. nicht-immunes IgG, Eingangschromatin) sind unerlässlich.
• Aufgrund der hohen Konservierung des N-Terminus von Histon H4 wird eine breite Kreuzreaktivität zwischen Mensch, Maus, Ratte und potenziell anderen Spezies vorausgesagt. Dennoch wird eine experimentelle Überprüfung in der Zielspezies empfohlen.

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