Acetyl-Histon H4-K12 Kaninchen mAb (P62805) für ChIP, WB und IHC-P | CamelBio

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H4

Histon H4 ist eines der vier Kern-Histonproteine, die das Nukleosom bilden, die grundlegende Wiederholungseinheit der Chromatin. Zusammen mit den Histonen H2A, H2B und H3 windet und verdichtet es DNA und reguliert dadurch den Zugang zum genetischen Material. Diese Verdichtung ist essenziell für die korrekte Chromosomensegregation während der Zellteilung und für die räumliche Organisation des Genoms im Zellkern. Histon H4 spielt eine zentrale Rolle bei DNA-abhängigen Prozessen wie Transkription, Replikation und Reparatur, indem es die Zugänglichkeit der DNA durch eine komplexe Vielfalt posttranslationaler Modifikationen kontrolliert, die gemeinsam als Histon-Code bezeichnet werden.
Zugehörige Referenzen: UniProt P62805

Der N-terminale Schwanz von Histon H4 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und anderen. Die Acetylierung an Lysin 12 (H4K12ac; entspricht Rest 13 des reifen Proteins) ist eine gut charakterisierte Histonmarke, die mit transkriptionell aktivem Chromatin assoziiert ist und von verschiedenen Bromodomänen enthaltenden Proteinen erkannt wird. Diese Modifikation wird dynamisch durch Histonacetyltransferasen (HATs) und Deacetylasen (HDACs) reguliert, und ihre Anwesenheit an bestimmten genomischen Loci korreliert mit Genaktivierung und offenem Chromatin.
Zugehörige Referenzen: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735

Histon H4 ist überwiegend im Zellkern lokalisiert und eng mit chromosomaler DNA assoziiert. In bestimmten Kontexten, wie während der Spermatogenese, wird acetyliertes Histon H4 im Kern von elongierenden Spermatiden angereichert, was auf eine Rolle bei der Chromatinremodellierung während der Keimzellentwicklung hindeutet. Das Protein wird ubiquitär in allen Geweben exprimiert, was seine grundlegende Rolle für die Chromatinstruktur widerspiegelt.
Zugehörige Referenzen: UniProt P62805

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Chromatin-Immunopräzipitations (ChIP)-Experimente optimieren Sie bitte die Vernetzungszeit und Sonikationsbedingungen, um Chromatin auf eine Größe von 200–500 bp zu scheren, da Histon-DNA-Wechselwirkungen sehr stabil sind.
• Beim Western Blot kann die Anreicherung von Histonen durch Säureextraktion oder Histon-Reinigungskits das Signal verbessern. Halten Sie Proben auf Eis und fügen Sie geeignete Histondeacetylase-Inhibitoren hinzu, wenn die Acetylierungslevel erhalten bleiben müssen.
• Dieser Antikörper hat aufgrund der hochkonservierten Sequenz von Histon H4 eine vorausgesagte breite Kreuzreaktivität über Spezies hinweg. Validieren Sie den Antikörper in der von Ihnen genutzten Spezies- und Gewebesystem, da Acetylierungsmuster variieren können.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) werden Antigen-Retrieval mit Citratpuffer und sorgfältige Optimierung der Antikörperkonzentration empfohlen, um eine spezifische Kernfärbung zu erreichen.
• Das kaninchen-monoklonale Format bietet konsistente Chargenkonstanz und hohe Spezifität, wodurch es sich für Mehrprobenvergleiche und quantitative Assays eignet.

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