Acetyl-Histon H3 K9 (Q16695/P68431) Kaninchen polyklonaler Antikörper - WB IP IF IHC ChIP ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, der fundamentalen wiederkehrenden Einheit von Chromatin. Nukleosomen wickeln und komprimieren DNA und regulieren so die Zugänglichkeit für die transkriptionelle Maschinerie. Histone, einschließlich H3, spielen zentrale Rollen bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomaler Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird dynamisch durch eine Vielzahl von posttranslationalen Modifikationen (PTMs) an Histonen, kollektiv als „Histon-Code“ bekannt, und Nukleosom-Remodelling reguliert.

Histon H3 lokalisiert sich im Zellkern und auf den Chromosomen. Beim Menschen existieren zwei Hauptisoformen: das kanonische replikationsabhängige Histon H3.1 (kodiert durch mehrere Gene wie H3C1/HIST1H3A, H3C2/HIST1H3B usw., UniProt: P68431) und das replikationsunabhängige, testisspezifische Histon H3.1t (kodiert durch H3-4/HIST3H3, UniProt: Q16695). Während H3.1 weit verbreitet exprimiert wird, ist die Expression von H3.1t auf Hodenzellen beschränkt.

Ein Kennzeichen von Histon H3 ist seine umfangreiche Reihe an PTMs, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und andere. Die Acetylierung an Lysin 9 (K9) von H3 ist ein gut charakterisiertes epigenetisches Merkmal, das allgemein mit transkriptionell aktivem Euchromatin und offenen Chromatinregionen assoziiert ist. Diese Modifikation wird dynamisch durch Histonacetyltransferasen (HATs) und Deacetylasen (HDACs) reguliert und trägt zur Genregulation, Zellzyklussteuerung und Entwicklung bei. Die Acetylierung an mehreren anderen Lysinresten von H3 wurde experimentell bestätigt und teilt ähnliche regulatorische Rollen.

Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:16185088

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von menschlichem Histon H3 abdeckt, was zur Erkennung mehrerer H3-Varianten führen kann. Erwägen Sie, die Spezifität für die Zielisoform in Ihrem Probensystem zu verifizieren.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei ca. 15 kDa erwartet. Histon-Extraktionsprotokolle und geeignete Ladungskontrollen werden für optimale Ergebnisse empfohlen.
• Für IP- und ChIP-Anwendungen validieren Sie den Antikörper unter Ihren spezifischen Bedingungen. Fügen Sie bei ChIP-seq Input-DNA und unspezifische IgG-Kontrollen hinzu und optimieren Sie die Vernetzung (Cross-linking) falls erforderlich.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) können Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden die Epitop-Zugänglichkeit beeinflussen; testen Sie verschiedene Protokolle, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Der Antikörper hat eine vorhergesagte breite Kreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte, andere), bestätigen Sie jedoch stets die Leistung in Ihrem experimentellen Setup.

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