Acetyl-Histon H3-K4 Kaninchen monoklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, IP, IHC, ChIP, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, der grundlegenden Wiederholungseinheit des Chromatins. Zusammen mit den Histonen H2A, H2B und H4 bildet es ein Oktamer, um das etwa 147 bp DNA gewickelt sind. Dies erleichtert die Kompaktierung und Organisation der DNA im Zellkern. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Nukleosomen regulieren die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinerien und spielen daher eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, der DNA-Reparatur, der DNA-Replikation und der chromosomalen Stabilität. Diese regulatorische Funktion wird durch eine komplexe Reihe von posttranslationalen Modifikationen (PTMs) an Histonen vermittelt, die gemeinsam als „Histon-Code“ bezeichnet werden. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Acetylierung ist eine der am umfangreichsten untersuchten PTMs und wird im Allgemeinen mit einem offenen, transkriptionell aktiven Chromatinzustand in Verbindung gebracht. Die Acetylierung spezifischer Lysinreste, einschließlich Lysin 4 (H3K4ac), spielt eine entscheidende Rolle bei der epigenetischen Regulation und der Genexpression. Verwandte Referenzen: UniProt P68431 (Acetylierungsannotation)

Bei Säugetieren existieren mehrere Varianten von Histon H3. Das kanonische H3.1 (kodiert von mehreren Genen, wie denen unter der Zugangsnummer P68431) wird während des gesamten Zellzyklus exprimiert, während die H3.1t-Variante (Zugangsnummer Q16695) in Hodenzellen exprimiert wird. Das Epitop für diesen Antikörper liegt in einer hochkonservierten N-terminalen Schwanzregion, was eine breite Artkreuzreaktivität ermöglicht. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Histon H3 ist im Zellkern lokalisiert und eng mit chromosomaler DNA assoziiert. Sein Vorkommen in aktiv transkribierten Regionen und an regulatorischen Elemente unterstreicht die Bedeutung der Untersuchung ortsspezifischer Modifikationen wie der H3K4-Acetylierung. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid um Lysin 4 des menschlichen Histon H3, das entwickelt wurde, um spezifisch die acetylierte Form von H3K4 zu erkennen.
• Empfohlene Anwendungen sind Western Blot (Nachweis einer Bande bei ~15 kDa), Immunpräzipitation, Immunfluoreszenz/ICC, Immunhistochemie (Paraffin), Dot Blot, Chromatin-Immunpräzipitation und ELISA.
• Für ChIP sollten Sie die Crosslinking- und Sonikationsbedingungen optimieren; die Spezifität des Antikörpers für das acetylierte Epitop macht ihn geeignet für die Erfassung aktiv transkribierter Chromatinregionen.
• Bei der Verwendung für IP oder IF validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Probensystem und schließen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen ein (z. B. Behandlung mit Histondeacetylase-Inhibitoren zur Erhöhung des Acetylierungsgrades).
• Aufgrund der hohen Konservierung über Arten hinweg wird eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus, Ratte und anderen Arten erwartet (breites Spektrum vorausgesagt); bei nicht typischen Arten ist bei Bedarf eine Validierung durchzuführen.
• Für kritische Anwendungen kann eine Voradsorption mit nicht acetyliertem Peptid in Betracht gezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen.

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