Acetyl-Histon H3 (K36) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB und ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3-Funktion und Lokalisierung

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und kompaktiert, und spielt somit eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird dynamisch durch posttranslationale Modifikationen (PTMs) reguliert, die gemeinhin als "Histon-Code" bezeichnet werden. Verwandte Referenzen: UniProtKB P68431

Acetylierung an Lysin 36 (K36, entsprechend Position 37 im reifen H3-Protein) ist eine gut charakterisierte Modifikation, die mit aktiv transkribiertem Chromatin assoziiert ist. Diese Acetylierungsmarkierung wird dynamisch durch Histonacetyltransferasen eingeführt und durch Deacetylasen entfernt, was zur Regulation der Genexpression und Chromatinstruktur beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:17189264, PMID:17194708

Das kanonische Histon H3.1 (kodiert durch multiple Gene wie H3C1–H3C12) wird ubiquitär exprimiert, während die testisspezifische Variante H3.1t (H3-4) auf Hodenzellen beschränkt ist. Der Antikörper erkennt acetyliertes K36 über mehrere H3-Varianten hinweg aufgrund der Sequenzkonservierung um die Modifikationsstelle. Verwandte Referenzen: UniProtKB Q16695

Die subzelluläre Lokalisierung von Histon H3 ist nukleär, eng mit chromosomaler DNA während des gesamten Zellzyklus assoziiert. Phosphoryliertes H3 ist ein weit verbreiteter Marker für Chromosomenkondensation während der Mitose. Verwandte Referenzen: UniProtKB P68431

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid, das K36 von humanem Histon H3 umspannt. Um die Antikörperspezifität zu bestätigen, sollten Peptid-Blockierungsassays unter Verwendung des acetylierten gegenüber dem nicht-acetylierten Peptid in Betracht gezogen werden.
• Validieren Sie in Western-Blot (WB)-Anwendungen den Antikörper in relevanten Probensystemen (z.B. HeLa-Ganzzelllysaten) und verwenden Sie geeignete Kontrollen wie Histone, die aus mit HDAC-Inhibitoren behandelten Zellen extrahiert wurden, um die Acetylierung anzureichern.
• Für ELISA kann das acetylierte Peptid als Beschichtungsantigen verwendet werden; die Aktivität sollte gegen das unmodifizierte Peptid verifiziert werden, um modifikationsspezifische Bindung sicherzustellen.
• Dieser Antikörper zeigt eine breite Artenkreuzreaktivität (Mensch, Maus, Ratte und vorhergesagtes breites Spektrum), es ist jedoch ratsam, die Reaktivität zunächst in der spezifischen interessierenden Spezies und Gewebeart zu überprüfen.
• Aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz überwacht werden; führen Sie in jedem Experiment einen Positivkontrollstandard mit.

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