Acetyl-Histon H3-K27 Kaninchen monoklonaler Antikörper für ChIP, WB & IHC (SWISS: Q16695 / P68431)

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3 (K27-Acetylierung)

• Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin einwickelt und kompaktiert. Dadurch wird die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinen, die DNA als Template benötigen, begrenzt. Histone spielen eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die Zugänglichkeit der DNA wird dynamisch durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen (PTMs), die zusammen als Histon-Code bezeichnet werden, sowie durch Nukleosomen-Remodellierung reguliert. Zugehörige Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Histon H3 ist primär im Zellkern lokalisiert und ein wichtiger Strukturbestandteil von Chromosomen. Es kommt sowohl im Euchromatin als auch im Heterochromatin vor, wobei dessen PTM-Muster diese Zustände unterscheiden. Zugehörige Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Zwei wichtige Isoformen werden durch die SWISS-Zugänge Q16695 (testisspezifisches Histon H3.1t) und P68431 (replika-tionsabhängiges Histon H3.1), das weit verbreitet exprimiert wird, dargestellt. Die testisspezifische Variante wird ausschließlich in Hoden Zellen exprimiert. Zugehörige Referenzen: UniProt Q16695
• Histon H3 unterliegt einer Vielzahl posttranslationaler Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung und ADP-Ribosylierung. Die Acetylierung spezifischer Lysinreste ist eine kritische epigenetische Markierung, die mit transkriptioneller Aktivierung verbunden ist. Beispielsweise wurde die Acetylierung an Lysin 19 (K19ac) in mehreren Studien identifiziert (PMID:19608861). Während die UniProt-Wissensdatenbank derzeit die Acetylierung an K27 nicht annotiert, ist diese Modifikation in der Literatur eine gut charakterisierte Markierung. Die Acetyl-Lysin-Markierung wird dynamisch durch Histonacetyltransferasen (HATs) und Deacetylasen (HDACs) reguliert und beeinflusst die Chromatinstruktur und Genexpression. Zugehörige Referenzen: PMID:19608861, UniProt Q16695

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid um Position K27, was die Antikörperspezifität für den acetylierten Zustand bestätigt. Überprüfen Sie die Spezifität mit nicht acetylierter Peptidkompetition oder enzymatischen Deacetylierungskontrollen.
• Dieser Antikörper wurde für ein breites Anwendungsspektrum validiert: Western Blot (WB), Dot Blot (DB), Immunhistochemie-Paraffin (IHC-P), Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC), ELISA, Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) und ChIP-seq. Für ChIP-Anwendungen sollten Sie die Optimierung der Quervernetzung und Antikörperkonzentration für Ihren spezifischen Chromatinkontext in Betracht ziehen.
• Das vorausgesagte Molekulargewicht beträgt 15 kDa. Verwenden Sie SDS-PAGE-Gele mit hohem Prozentsatz (z. B. 15%) oder Gradientengele für eine optimale Auflösung von niedermolekularen Proteinen.
• Kreuzreaktivität wird auf Grundlage der Histon-H3-Sequenzkonservierung für Mensch, Maus, Ratte und andere Arten vorausgesagt (Breites Spektrum vorausgesagt). Validieren Sie bei nicht aufgeführten Arten in Ihrer Zielart.
• Histon-Extraktionsprotokolle (Säureextraktion oder hoher Salzgehalt) können das Signal bei Western Blot durch die Anreicherung von Kernproteinen verbessern.
• Für quantitative Anwendungen sollten Sie rekombinantes Histon H3 mit und ohne K27-Acetylierung als Standard verwenden.

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