Acetyl-Histon H3-K23 Kaninchen polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, ChIP, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente von Nukleosomen, den grundlegenden Wiederholungseinheiten des Chromatins. Nukleosomen wickeln und komprimieren DNA und schränken den Zugang für zelluläre Maschinen ein, die DNA als Template benötigen. Durch diese strukturelle Rolle sind Histone zentral für die Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomale Stabilität. Die Zugänglichkeit wird dynamisch durch eine komplexe Reihe posttranslationaler Modifikationen (PTMs), die gemeinsam als Histon-Code bezeichnet werden, sowie durch Nukleosomen-Remodellierung moduliert.

Die Acetylierung an Lysin 23 (K23) des N-terminalen Endes von Histon H3 ist eine bedeutende PTM, die zur Chromatindekondensation und Genaktivierung beiträgt. Diese Position wird aufgrund der Abspaltung der Initiator-Methionin bei einigen Nummerierungssystemen als K24 geführt. Mehrere Studien haben die K23-Acetylierung in verschiedenen zellulären Kontexten nachgewiesen und sie mit offenen Chromatinzuständen und der Transkriptionsregulation verbunden.

Verwandte Referenzen: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16457588

Das Histon H3.1-Protein (kodiert durch Gene wie H3C1, H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 und HIST1H3A) ist typischerweise im Zellkern und auf Chromosomen lokalisiert. Die hodenspezifische H3.1t-Isoform (Q16695) wird in Hodenzellen exprimiert, während das kanonische H3.1 (P68431) ubiquitären vorkommt. Beide Varianten teilen die konservierte K23-Acetylierungsstelle.

Histon H3 unterliegt zahlreichen weiteren PTMs, darunter Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und andere Acylierungen, die die Chromatinfunktion komplex regulieren. Die Spezifität des Antikörpers für die acetylierte K23-Form ermöglicht die präzise Aufklärung dieser Regulationsmechanismen.

Experimentelle Hinweise und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches acetyliertes Peptid erzeugt, das den Resten um Position K23 des menschlichen Histons H3 entspricht. Aufgrund der Sequenzkonservierung dieser Region wird eine Kreuzreaktivität über ein breites Artenspektrum vorausgesagt; bestätigen Sie dies immer mit Ihren eigenen Proben.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande um 15 kDa zu erwarten. Laden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen (z. B. Zellen behandelt mit Histondeacetylase-Inhibitoren vs. unbehandelt), um das acetylierungsabhängige Signal zu bestätigen.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann eine Optimierung der Antigenrettung und Blockierung erforderlich sein; validieren Sie die Spezifität gegebenenfalls durch Peptidkonkurrenz oder Knockout-Zelllinien.
• Für Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) sorgen Sie für eine korrekte Quervernetzung und Scherung. Fügen Sie einen unspezifischen IgG-Kontrolle hinzu und testen Sie verschiedene Antikörperkonzentrationen. Dieser Antikörper ist gemäß Herstellerangaben für ChIP geeignet.
• ELISA und andere Anwendungen sollten im jeweiligen Probensystem validiert werden. Sensitivität und Spezifität können zwischen Assays variieren.
• Wie bei allen ortsspezifischen modifikationsspezifischen Antikörpern kann die Charge-Charge-Konsistenz die Ergebnisse beeinflussen; titrieren Sie immer die optimale Arbeitsverdichtung und bestätigen Sie diese.

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