Acetyl-Histon H3 (K23) Kaninchen monoklonaler Antikörper (Q16695 / P68431) für WB, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3-Funktion und Lokalisierung

Chromatin-Architektur und Genomstabilität: Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, grundlegend für die Verpackung von DNA zu Chromatin. Es spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und der Aufrechterhaltung der chromosomalen Stabilität. Das dynamische Remodeling von Nukleosomen steuert die Zugänglichkeit der DNA für die Transkriptionsmaschinerie und andere Faktoren. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695/P68431

Nukleäre und chromosomale Lokalisierung: Histon H3 befindet sich überwiegend im Zellkern und ist während des gesamten Zellzyklus eng mit Chromosomen assoziiert, was seine strukturellen und regulatorischen Funktionen untermauert. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695/P68431

Isoformen-Vielfalt: Das humane Genom kodiert für mehrere Histon H3-Varianten. Die SWISS-Identifikatoren Q16695 (H3.1t) und P68431 (kanonisches H3.1) heben jeweils gewebespezifische und ubiquitär exprimierte Isoformen hervor. H3.1t wird spezifisch in testikulären Zellen exprimiert, während H3.1 weit verbreitet ist. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695/P68431

Posttranslationale Modifikationen (PTMs): Histon H3 unterliegt einer Vielzahl von PTMs, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Citrullinierung, die gemeinsam den "Histon-Code" bilden. Die Acetylierung an Lysin 23 (H3K23ac) ist eine spezifische Modifikation, die die Chromatinstruktur und Genexpression moduliert, ähnlich wie andere gut charakterisierte Acetylierungsstellen wie K19 und K24. Verwandte Referenzen: PMID:19608861

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Spezifitätsüberprüfung: Da das Immunogen ein acetyliertes Peptid um K23 ist, wird erwartet, dass der Antikörper acetyliertes Histon H3 an K23 (H3K23ac) erkennt. Integrieren Sie geeignete Kontrollen, wie z.B. Blockierung mit nicht-acetyliertem Peptid oder Behandlung mit Deacetylase-Inhibitoren, um die Spezifität zu bestätigen.
• Probenvorbereitung: Für Western Blotting liefern mit Histonen angereicherte Lysate (z.B. säureextrahierten Histone) oft optimale Signale. Erwägen Sie, verschiedene Extraktionsmethoden zu testen, um die Detektionseffizienz in Ihrem spezifischen Modellsystem zu bewerten.
• Kreuzreaktivität: Der Lieferant vermerkt eine breite vorhergesagte Kreuzreaktivität (Human, Maus, Ratte, Andere), jedoch wird eine unabhängige Validierung in Ihrer Zielspezie und Ihrem Probentyp empfohlen.
• ELISA-Aufbau: Bei der Entwicklung von ELISA-Assays verwenden Sie das acetylierte H3K23-Peptid als Standard oder positive Kontrolle. Kombinieren Sie es bei Bedarf mit einem Pan-Histon H3-Fängerantikörper für Sandwich-ELISA-Formate.
• Immunfluoreszenz (IF/ICC): Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten. Eine Co-Färbung mit einem Gesamt-Histon H3-Antikörper kann helfen, die Lokalisierung und Färbespezifität zu bestätigen.
• Allgemeiner Hinweis: Alle vorgeschlagenen Protokolle sind Ausgangspunkte; eine empirische Optimierung ist unerlässlich, um die beste Leistung in Ihrem experimentellen Kontext zu erzielen.

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