Acetyl-Histon H3-K14 Kaninchen-monoklonaler Antikörper (Q16695 / P68431) für WB, DB, ChIP, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

• Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin umhüllt und verdichtet, wodurch die DNA-Zugänglichkeit für Transkription, Replikation, Reparatur reguliert und die chromosomale Stabilität erhalten wird. Diese Rolle ist für alle DNA-abhängigen Prozesse essenziell. Verwandte Referenzen: PMID:16185088, PMID:16267050
• Die H3-Isoformen H3.1 (kodiert durch mehrere Genkopien, z. B. HIST1H3A-J) und H3.1t (hodenspezifisch, kodiert durch HIST3H3) teilen die gleische Histonfaltendomäne und sind hauptsächlich im Zellkern und auf Chromosomen lokalisiert. H3.1t wird spezifisch in Hodenzellen exprimiert, während kanonisches H3.1 breit exprimiert wird.
• Posttranslationale Modifikationen von Histonen, insbesondere Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und andere, bilden den "Histon-Code", der die Chromatindynamik steuert. Die Acetylierung an Lysin 14 von Histon H3 (H3K14ac) ist ein Kennzeichen aktiven Chromatins und wird von Proteinen mit Bromodomänen erkannt. Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:16627869
• Der Antikörper zielt spezifisch auf die acetylierte Form von K14 ab und ermöglicht die Untersuchung der H3K14ac-vermittelten Transkriptionsregulation und epigenetischen Markierungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid um K14 des menschlichen Histons H3. Bei der Entwicklung ähnlicher Antikörper sollten Sie ein acetyliertes Peptid verwenden, um die Spezifität für die acetylierte Form sicherzustellen.
• Für Western Blotting (WB) validieren Sie den Antikörper mit Gesamtzelllysaten aus menschlichen, Maus- oder Rattenzellen. Eine Behandlung mit Histondeacetylase-Inhibitoren (z. B. TSA oder Natriumbutyrat) kann das Signal verstärken und die acetylierungsabhängige Detektion bestätigen.
• Bei der Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) sind Standardprotokolle für Quervernetzung und Scherung geeignet. Es wird empfohlen, geeignete Kontrollen (z. B. nicht acetylierte Peptid-Konkurrenz, normales Kaninchen-IgG) einzubeziehen, um die ChIP-Grad-Spezifität sicherzustellen.
• Verwenden Sie für ELISA- und Dot-Blot (DB)-Anwendungen acetylierte versus nicht acetylierte H3K14-Peptide als Positiv- und Negativkontrollen, um die Bindung zu überprüfen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde beobachtet; Benutzer sollten den Antikörper jedoch in ihrem spezifischen Experimentalsystem validieren, da die Expression und Modifikationsniveaus des Ziels variieren können.

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