Acetyl-alpha Tubulin K40 Kaninchen monoklonaler Antikörper (Q71U36) für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Tubulin alpha-1A-Ketten-Funktion und Lokalisierung

• Tubulin ist der Hauptbestandteil von Mikrotubuli und bildet eine zylindrische Struktur aus lateral assoziierten Alpha- und Beta-Tubulin-Heterodimeren. Mikrotubuli wachsen durch Hinzufügen von GTP-gebundenen Dimeren zum Plus-Ende, wo sich eine stabilisierende Kappe bildet. Unterhalb der Kappe wandelt die GTP-Hydrolyse (EC 3.6.5.-) Tubulin in einen GDP-gebundenen Zustand um, was es anfällig für Depolymerisation macht. Diese dynamische Instabilität ist grundlegend für Zellteilung, intrazellulären Transport und strukturelle Integrität. Verwandte Referenzen: UniProt Q71U36.

• Alpha-Tubulin ist hauptsächlich im Zytoplasma und Zytoskelett lokalisiert. Es ist auch ein Bestandteil von Zilien- und Flagellen-Axonemen, wo es den mikrotubulären Kern bildet, der für Motilität und Signalübertragung essentiell ist. Verwandte Referenzen: UniProt Q71U36.

• Die Expression ist besonders hoch im fetalen Hirngewebe, was auf eine kritische Rolle in der frühen neuronalen Entwicklung und Axonbildung hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:17584854.

• Der Antikörper erkennt spezifisch an Lysin 40 (K40) acetyliertes Alpha-Tubulin. Acetylierung an diesem Rest ist ein Marker für stabile Mikrotubuli, insbesondere in Neuronen, Zilien und Flagellen. Alpha-Tubulin unterliegt auch anderen posttranslationalen Modifikationen wie Polyglutamylierung, Phosphorylierung und Nitrotyrosinierung, die die Mikrotubuli-Funktion und -Wechselwirkungen regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:24906155; PMID:32747782; PMID:10339593.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches acetyliertes Peptid um K40; daher erwartet man, dass der Antikörper acetyliertes Alpha-Tubulin bevorzugt gegenüber der nicht-acetylierten Form detektiert. Ziehen Sie die Verwendung von Acetylase-Inhibitoren oder Kontrollbehandlungen in Betracht, um acetylierungsspezifische Signale zu validieren.
• Für Western Blotting wird ein Hauptband bei ~50 kDa erwartet. Verwenden Sie frische Proben mit Proteaseinhibitoren und vermeiden Sie mehrere Gefrier-Tau-Zyklen, um labile Acetylierungsmarkierungen zu erhalten.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie die Antigen-Demaskierung und Fixierung (z.B. 4% Paraformaldehyd), um die Epitop-Verfügbarkeit aufrechtzuerhalten. Schließen Sie Isotypenkontrollen und Primärantikörper-freie Kontrollen ein, um die Färbespezifität zu bestätigen.
• Angesichts der hohen Expression im fetalen Gehirn können Hirngewebe oder neuronale Zelllinien als positive Kontrollen dienen. Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht translationale und präklinische Studien.
• Für ELISA: Beschichten Sie mit acetyliertem Peptid oder rekombinantem Protein, um die Bindung zu bewerten. Verwenden Sie nicht-acetyliertes Peptid als Negativkontrolle, um die Epitopspezifität sicherzustellen.

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